ForumDenizi.Com - Dna'nın Vektöre Aktarılması

Dna`nın Vektöre Aktarılması

Hem plasmid hem de insan DNA’sı aynı
restriksiyon enzimi ile kesilir. Enzim, plasmid DNA’yı tek bir restriksiyon bölgesinden lacZ genini bozarak keser. Enzim
aynı şekilde insan DNA’sını binlerce DNA parçası oluşturacak şekilde keser.Plasmid ve insan DNA’sı birbirine uyan
yapışkan uçlar oluştururlar. İnsan DNA fragmentleri kesilmiş plasmidlerle karıştırılır. Plasmid yapışkan uçları, insan DNA
fragmentlerinin komplementer yapışkan uçları ile baz çiftleri oluşturur. Bunun yanı sıra, iki plasmidin bir araya gelmesi, plasmidin kendi kendine kapanması ya da plasmidin çeşitli DNA parçalarıyla birleşmesi gibi kombinasyonlar da ortaya çıkabilir. DNA moleküllerini kovalent bağlarla birleştirmek üzere DNA ligaz enzimi uygulanır. Sonuç olarak, rekombinant DNA’lardan oluşan bir karışım oluşur.